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大鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒

更新时间:2021-06-27

简要描述:

大鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 应用双抗体夹心法测定标本中大鼠碱性磷酸酶(ALP)水平。用纯化的大鼠碱性磷酸酶(ALP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入碱性磷酸酶(ALP),再与HRP标记的碱性磷酸酶(ALP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

厂商性质:代理商浏览量:98

检测范围:96T

1IU/L - 40IU/L

使用目的:

大鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中碱性磷酸酶(ALP)含量。

实验原理

大鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 应用双抗体夹心法测定标本中大鼠碱性磷酸酶(ALP)水平。用纯化的大鼠碱性磷酸酶(ALP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入碱性磷酸酶(ALP),再与HRP标记的碱性磷酸酶(ALP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的碱性磷酸酶(ALP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠碱性磷酸酶(ALP)浓度。

试剂盒组成

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1瓶

7

终止液

6ml×1瓶

2

酶标试剂

6ml×1瓶

8

标准品(80IU/L)

0.5ml×1瓶

3

酶标包被板

12孔×8条

9

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

4

样品稀释液

6ml×1瓶

10

说明书

1份

5

显色剂A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2张  

6

显色剂B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1个

标本要求 

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

Assay procedure

  • Dilute and add sample:Dilute Original density Standard as follow table:

40 IU/L

5 Standard

150μl Original density Standard+150μl Standard diluent

20IU/L

4 Standard

150μl 5 Standard+150μl Standard diluent

10IU/L

3 Standard

150μl 4 Standard+150μl Standard diluent

5IU/L

2 Standard

150μl 3 Standard +150μl Standard diluent

2.5IU/L

1 Standard

150μl 2 Standard +150μl Standard diluent

2.add sample:Set blank wells separately (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.

3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.

4.Configurate liquid: 30-fold(or 20-fold) wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.

5.washing:Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.

6.add enzyme:Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except  blank well.

7.incubate:Operation with 3.

8.washing:Operation with 5.

9.color:Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B 50ul to each well, evade the light preservation for 10 min at 37℃

10.Stop the reaction:Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).

11.assay:take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.

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