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人白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒

更新时间:2021-06-22

简要描述:

人白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素 1β(IL-1β)水平。用纯化的人
白细胞介素 1β(IL-1β)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
白细胞介素 1β(IL-1β),再与 HRP 标记的白细胞介素 1β(IL-1β)抗体结合,形成抗体
-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。

厂商性质:代理商浏览量:205
人白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒
检测范围:
96T
1pg/ml-40pg/ml
人白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中白细胞介素 1β(IL-1β)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素 1β(IL-1β)水平。用纯化的人
白细胞介素 1β(IL-1β)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
白细胞介素 1β(IL-1β),再与 HRP 标记的白细胞介素 1β(IL-1β)抗体结合,形成抗体
-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB HRP 酶的催化下转化
成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素 1β(IL-1
β)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中
人白细胞介素 1β(IL-1β)浓度。
试剂盒组成
1
30 倍浓缩洗涤液
20ml×1
7
终止液
6ml×1
2
酶标试剂
6ml×1
8
标准品(80pg/ml
0.5ml×1
3
酶标包被板
12 孔×8
9
标准品稀释液
1.5ml×1
4
样品稀释液
6ml×1
10
说明书
1
5
显色剂 A
6ml×1
11
封板膜
2
6
显色剂 B
6ml×1/
12
密封袋
1
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
40pg/ml
5 号标准品
150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液
20pg/ml
4 号标准品
150μl 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
10pg/ml
3 号标准品
150μl 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
5pg/ml
2 号标准品
150μl 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2.5pg/ml
1 号标准品
150μl 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl
然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.
温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.
配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。
6.
加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
7.
温育:操作同 3
8.
洗涤:操作同 5
9.
显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10 分钟.
10.
终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.
测定:以空白孔调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
 

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