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H4IIE-RFP细胞

更新时间:2021-06-17

简要描述:

H4IIE-RFP细胞
规格:70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶
特点:细胞代数为4代以内
包装:内层无菌自封袋;专用防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC、sciencell、ICLC
货期:2-3周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时联系销售人员

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H4IIE-RFP​细胞​
规格:70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶
特点:细胞代数为4代以内
包装:内层无菌自封袋;专用防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC、sciencell、ICLC
货期:2-3周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时联系销售人员,我们将尽快为您解决

H4IIE-RFP细胞

1,签收细胞后状态稳定可以先冻存留种
2,传代当天用普通培养基,不要加嘌呤霉素,待细胞培养1-2天,密度达到40%后再加
3,阶梯式加药:待到细胞密度40%以上后,初次加1ug/ml维持观察2天左右,细胞状态无影响再加到1.5-2ug/ml,观察2天无影响后,最后加到3ug/ml
4,复苏后,待细胞状态稳定,密度40%以后,直接加3ug/ml,梯度加药主要是针对第一次使用嘌呤霉素的时候,以免不同实验室的药物浓度和活性差异较大,第一次直接使用高浓度把细胞状态弄受损
5,冻存后复苏初期,可以用15%血清,让状态尽快稳定,然后再降为10%

GFP 和 RFP 分别转染的绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白 直接在荧光显微镜下 即可观察
LUC是萤火虫荧光素酶 需要加底物(D-荧光素钠盐)发光  激发和发射波长分别为328nm和533nM

 

细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。从细胞资源中心获得细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。
将细胞悬液移入离心管,1000rpm/min 离心5分钟。上清培养液移入无菌瓶中,留待日后培养用。离心下来的细胞T25瓶中加培养液6-8ml,混匀后放入37℃、5%CO2孵箱培养。
传代方法:
细胞生长至1X106/ml时(一般情况),将细胞悬液移入离心管800-1000rpm/min离心5分钟,然后弃上清,加新鲜培养液混匀,1瓶分成3瓶(或6瓶-10瓶),每T25瓶加培养基至6-8ml,37℃、5%CO2孵箱培养

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