HepG2.2.15-RFP细胞

HepG2.2.15-RFP​细胞

规格：70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶

特点：细胞代数为4代以内
包装：内层无菌自封袋；专用防压泡沫盒；外层防压保温气泡袋；说明书
细胞来源：ATCC、sciencell、ICLC
货期：2-3周
运输方式：快递运输
售后：收到细胞后7天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时联系销售人员，我们将尽快为您解决

HepG2.2.15-RFP细胞

1，签收细胞后状态稳定可以先冻存留种
2，传代当天用普通培养基，不要加嘌呤霉素，待细胞培养1-2天，密度达到40%后再加
3，阶梯式加药：待到细胞密度40%以上后，初次加1ug/ml维持观察2天左右，细胞状态无影响再加到1.5-2ug/ml，观察2天无影响后，最后加到3ug/ml
4，复苏后，待细胞状态稳定，密度40%以后，直接加3ug/ml，梯度加药主要是针对第一次使用嘌呤霉素的时候，以免不同实验室的药物浓度和活性差异较大，第一次直接使用高浓度把细胞状态弄受损
5，冻存后复苏初期，可以用15%血清，让状态尽快稳定，然后再降为10%

GFP 和 RFP 分别转染的绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白 直接在荧光显微镜下 即可观察
LUC是萤火虫荧光素酶 需要加底物（D-荧光素钠盐）发光  激发和发射波长分别为328nm和533nm

应如何避免细胞污染？
细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染的好方法。
如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？
加入相应抗生素。直接灭菌后丢弃之。
支原体（mycoplasma） 污染的细胞， 是否能以肉眼观察出异状？
不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之。
支原体污染会对细胞培养有何影响？
支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数， 代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义。
CO2 培养箱之水盘如何保持清洁？
定期（至少每两周一次） 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之。