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B16-RFP细胞

更新时间:2021-06-17

简要描述:

B16-RFP细胞
规格:70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶
特点:细胞代数为4代以内
包装:内层无菌自封袋;专用防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC、sciencell、ICLC
货期:2-3周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时联系销售人员,我们将尽快为您解决

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B16-RFP细胞

规格:70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶

特点:细胞代数为4代以内
包装:内层无菌自封袋;专用防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC、sciencell、ICLC
货期:2-3周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时联系销售人员,我们将尽快为您解决MCF-7-GFP​细胞B16-RFP​细胞

1,签收细胞后状态稳定可以先冻存留种
2,传代当天用普通培养基,不要加嘌呤霉素,待细胞培养1-2天,密度达到40%后再加
3,阶梯式加药:待到细胞密度40%以上后,初次加1ug/ml维持观察2天左右,细胞状态无影响再加到1.5-2ug/ml,观察2天无影响后,最后加到3ug/ml
4,复苏后,待细胞状态稳定,密度40%以后,直接加3ug/ml,梯度加药主要是针对第一次使用嘌呤霉素的时候,以免不同实验室的药物浓度和活性差异较大,第一次直接使用高浓度把细胞状态弄受损
5,冻存后复苏初期,可以用15%血清,让状态尽快稳定,然后再降为10%

GFP 和 RFP 分别转染的绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白 直接在荧光显微镜下 即可观察
LUC是萤火虫荧光素酶 需要加底物(D-荧光素钠盐)发光  激发和发射波长分别为328nm和533nm

 

 

 
冻存操作步骤(缓冻):
冻存液成分:10%DMSO + 30%血清+基础培养液
1、取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液, 用吸管吹打制成细胞悬液(1×106 ~ 5 ×106细胞/ml)
2、加入1ml细胞于冻存管中,冷冻管置于4℃ 15 分钟→ -20℃ 30-60 分钟→ -80℃ 16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽长期储存 
复苏操作步骤:
实验前准备:
1.将水浴锅预热至37℃
2.用75%酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。
3.在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等

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