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A549/DDP耐药细胞

更新时间:2021-06-23

简要描述:

细胞株名称:A549/DDP耐药细胞
种属:人
组织来源:肺癌
生长特性:贴壁生长
形态特征:上皮细胞
微生物及支原体检测:阴性
安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。

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  细胞株名称:A549/DDP 人肺癌顺铂耐药株  A549/DDP耐药细胞
 
  种属:人
 
  组织来源:肺癌
 
  生长特性:贴壁生长
 
  形态特征:上皮细胞
 
  微生物及支原体检测:阴性
 
  安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。
 
  培养条件:
 
  完全培养基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+2000ng/ml DDP
 
  血清我们推荐用:
 
  GIBCOFBS-10099-141 或 HYCLONEFBS-SH30084.03。
 
  培养条件:37.0C   carbon dioxide(CO2),5%
 
  传代方法:
 
  收到细胞后,在倒置镜下(最好是在 4X 物镜)观察整个细胞生长情况。
 
  (一)如果细胞未长满,用 75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml 新鲜培养液后继续培养。
 
  (二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
 
  1. 弃去培养液,用 PBS(不含钙,镁离子)洗 1-2 次。
 
  2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱 1-3 分钟预热,之后翻转培养瓶 10-30 秒,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
 
  3. 按 6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的第一次传代一般是一传二。
 
  注:1、观察细胞最好在低倍镜(4 或 5X 物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在 10X 或 20X 物镜下。
 
  2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
 
  3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。
 
  4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们联系。
 
  A549/DDP耐药细胞冻存方法:
 
  冻存液:90%胎牛血清,10%DMSO
 
  储存:液氮储存
 

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